天美传媒有限公司

摘要：研究丹参酮IIA、隐丹参酮和丹参酮I组合物（组合物）在斑马鱼体内的代谢，探讨斑马鱼用于中药多组分代谢研究的可行性及合理性。

方法

2.1分组与给药

取斑马鱼成鱼，平均分成2组，每组5条，分别置于30 mL含有1% DMSO纯净水（空白鱼组）、含丹参酮IIA、隐丹参酮和丹参酮I组合物（丹参酮IIA、隐丹参酮、丹参酮I质量浓度分别为1.57、1.02、2.09μg/mL）的1% DMSO纯净水溶液（给药鱼组）棕色瓶中，同时设空白药物组（组合物1% DMSO纯净水溶液）。

2.2样品采集与处理

给药鱼组分别于斑马鱼暴露药液后0、1、2、4、6、8、12、18、24 h取药液4 mL各2份，24 h将鱼取出，用纯净水迅速洗涤3次，杀掉，去除鱼鳍和鱼磷，称质量，于−70 ℃冰箱放置。各时间点斑马鱼药液各2份分别混合，于−70 ℃冰箱放置。空白药物组于斑马鱼暴露药液后0、24 h时同法取样。将不同时间点取出的斑马鱼药液冷冻干燥，残渣加0.5 mL甲醇溶解，过0.22 μm滤膜，滤液20 μL进行HPLC-MS分析。取24 h空白鱼组和给药鱼组斑马鱼，混合，剪碎，称取1 g，加5 mL生理盐水匀浆，用蜀科高速冷冻离心机3 500 r/min离心10 min，上清液用等体积醋酸乙酯萃取3次，合并萃取液，氮气吹干，残渣加1 mL甲醇溶解制成1 g/mL的溶液，过0.22 μm滤膜，滤液20 μL进行HPLC-MS分析。

结果

组合物经斑马鱼作用后，产生丹参酮滨滨础和隐丹参酮的羟基化和脱氢产物，未发现丹参酮I的代谢产物。

结论

斑马鱼对组合物的代谢与大鼠或鼠肝微粒体的代谢机制高度一致，提示斑马鱼对该组合物的代谢具合理性，且具有化合物用量少、成本低、简单、等优点，为斑马鱼用于复杂的中药体系代谢研究提供依据。

了解蜀科仪器更多应用，可以点击：高速冷冻离心机